檢測(cè)儀器設(shè)備
1.高效液相色譜儀:具熒光檢測(cè)器。
2.色譜柱:填料粒徑為5pm，柱長(zhǎng)15cm，內(nèi)徑4.6mm的C18反相色譜柱，或其他等效色譜柱。
3.樣品瓶:500ml具磨口塞的棕色細(xì)口玻璃瓶或帶聚四氟乙烯襯墊的棕色螺紋口玻璃瓶。
4.微量注射器:10ul、50ul和100ul。
5.氮吹儀。
6.超聲波清洗儀:輸出功率在180W以上，工作頻率為40kHz。
7.固相萃取裝置。
檢測(cè)水樣采集
采樣前向樣品瓶中加入硫代硫酸鈉，每500ml樣品加入40mg。采樣時(shí)，應(yīng)使樣品充滿采樣瓶，不留液上空間。如果樣品的pH不在6-9之間，用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6-9。采集的樣品應(yīng)在4℃以下冷藏、避光保存，5d內(nèi)萃取。萃取后的洗脫液在4℃以下冷藏、避光保存，4d內(nèi)分析完畢。
水樣的制備
1.固相萃取柱的活化
將固相萃取柱固定在固相萃取裝置上，先用5ml甲醇以約2ml/min的流速通過(guò)固相萃取柱，在填料暴露于空氣之前，向柱上加5ml水，待水剩約2ml時(shí)，停止活化。
2.富集、凈化與濃縮
量取150ml水樣置于250ml錐形瓶中，以約2ml/min的流速通過(guò)活化后的固相萃取柱，水樣完全富集后，加入5ml乙酸溶液，待乙酸溶液完全流出后，加入8ml甲醇淋洗，待甲醇完全流出后，繼續(xù)用真空泵抽吸5min。用7ml氨水甲醇溶液洗脫，洗脫液收集到濃縮瓶中。然后將濃縮瓶置于氮吹儀上，在60℃濃縮至1ml，再用水定容至2.0ml，混勻后經(jīng)濾膜過(guò)濾到棕色水樣瓶中，待測(cè)。
3.空白試樣的制備
用實(shí)驗(yàn)用水代替水樣，按照與試樣的制備相同步驟進(jìn)行空白試樣的制備。
具體檢測(cè)步驟
1.色譜參考條件
流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：乙酸銨溶液；洗脫程序?yàn)榈榷认疵?，流?dòng)相A/流動(dòng)相B=20/80（V/V），流速：1.0ml/min；柱溫：40℃；激發(fā)波長(zhǎng)：292nm，檢測(cè)波長(zhǎng)：395nm；進(jìn)樣體積：40.0ul。
2.建立校準(zhǔn)曲線
分別取適量的聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅰ或聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)使用液Ⅱ，用甲醇水溶液稀釋，制備至少5個(gè)濃度點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)系列，聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度分別為2.00ug/L、5.00ug/L、10.0ug/L、50.0ug/L、100ug/L、200ug/L（此為參考濃度）。按照色譜參考條件，由低濃度到高濃度依次對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)樣，以聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度（ug/L）為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的色譜峰面積或峰高為縱坐標(biāo)，建立校準(zhǔn)曲線。
3.水樣的測(cè)定
被檢測(cè)水樣及空白試樣可以按照與校準(zhǔn)曲線的建立相同的條件進(jìn)行試樣的測(cè)定。
聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)色譜圖
最后定性分析也可根據(jù)水樣中聯(lián)苯胺化合物與標(biāo)準(zhǔn)系列中目標(biāo)化合物的保留時(shí)間進(jìn)行定性，可采用不同波長(zhǎng)下的熒光強(qiáng)度比輔助定性，必要時(shí)用高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法進(jìn)行確認(rèn)。而定量分析可以按照相關(guān)的公式進(jìn)行計(jì)算。
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