葉綠素是植物光合作用的重要光合色素，常見的有葉綠素a、b、c、d四種類型，其中葉綠素a是一種能將光合作用的光能傳遞給化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)的唯一色素，葉綠素b、c、d等吸收的光能均是通過葉綠素a傳遞給化學(xué)反應(yīng)系統(tǒng)的。通過測定葉綠素a，可掌握水體的初級生產(chǎn)力，了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的現(xiàn)存量。試驗表明，當(dāng)葉綠素a質(zhì)量濃度升至10 mg/m3以上并有迅速增加的趨勢時，就可以預(yù)測水體即將發(fā)生富營養(yǎng)化。因此，可將葉綠素a含量作為評價水體富營養(yǎng)化并預(yù)測其發(fā)展趨勢的指標(biāo)之一。
葉綠素a的測定方法有高效液相色譜法、分光光度法和熒光光譜法。高效液相色譜法精確度高，但操作步驟煩瑣。目前最常用的是分光光度法和熒光光譜法。分光光度法是常規(guī)的分析法，儀器設(shè)備簡單，靈敏度高，但是操作繁瑣，分析耗時長。此方法還需要對樣品進(jìn)行復(fù)雜的前處理過程，很難滿足水體藻類實時監(jiān)測要求?，F(xiàn)場葉綠素a檢測方法建議使用熒光法，熒光法測定葉綠素a應(yīng)用廣泛,該方法測定快速、操作簡單,無須任何試劑。
方法原理：當(dāng)丙酮提取液用436 nm的紫外線照射時，葉綠素a可發(fā)射670 nm的熒光，在一定濃度范圍內(nèi)，發(fā)射熒光的強度與其濃度成正比，因此，可通過測定樣品丙酮提取液在436 nm紫外線照射時產(chǎn)生的熒光強度，定量測定葉綠素a的含量。比起實驗室的萃取法操作極為簡單，高，量程大，非常適用于地表水、水源水的在線及便攜使用以及實驗室便攜使用。葉綠素的含量可以反映水體富營養(yǎng)化的程度。 |
